目的:探讨丝素蛋白无纺网作为耳廓软骨细胞外支架构建组织工程化软骨的可行性。方法:取成年新西兰兔耳廓软骨, 酶消化法获取软骨细胞, 体外培养扩增后取原代细胞接种到制备好的丝素蛋白无纺网支架上, 体外复合培养。每天倒置显微镜下观察细胞黏附、生长、增殖情况, 于复合培养第3、7、10天时取材进行扫描电镜观察;于复合培养第1、2、4、6周取材进行组织学评价, 同时取材通过RT-PCR方法检测复合物上软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA的表达情况。结果:48 h后软骨细胞已黏附于丝素蛋白纤维上, 72 h后细胞开始分泌少量细胞外基质;电镜下观察显示软骨细胞及分泌的薄层细胞外基质主要分布于支架材料表面。组织学观察显示2周时支架浅层已有一定厚度软骨组织, 可见少量类软骨陷窝, 4周和6周时支架浅层软骨组织增厚, 软骨陷窝增多, 但支架内部软骨细胞数目少, 细胞呈星形或梭形, 细胞分泌的基质也很少。RT-PCR检测显示在各检测时间点均有Ⅱ型胶原mRNA的表达。结论:兔耳廓软骨细胞在丝素蛋白无纺网支架上已初步形成软骨样组织, 但培养条件应进一步优化。

目的探讨脾脏切除对肝豆状核变性(Wilson's disease, WD)脾功能亢进(脾亢)病人肝功能的影响。方法97例WD病人作为病例组, 依据腹部二维彩超和血小板计数(PLT)将其分为脾正常组、脾大组、脾亢组, 同期31名健康体检人员作为对照组。比较组间肝功能各项指标差异。28例脾亢进病人进行了脾切除手术, 比较术前和术后肝功能各项指标差异。结果除天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶(m-AST)和乳酸脱氢酶(LDH)在各组间差异无统计学意义(P>0.05), 其余各肝功能指标在各组中差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01)。与对照组比较, 脾正常组中总胆汁酸(TBA)和活化部分凝血活酶时间(APTT)升高, 前白蛋白(PA)和血红蛋白(Hb)降低; 与脾正常组比较, 脾大组中总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)、总胆汁酸(TBA)、碱性磷酸酶(ALP)、腺苷脱氨酶(ADA)、凝血酶原时间(PT)、APTT升高, PA、血清纤维连接蛋白(FN)、PLT降低; 与脾大组比较, 脾亢组中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、DBIL、TBA、ADA、PT、APTT、凝血酶时间(TT)升高, PA、FN、总胆固醇(T-CHO)、白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、Hb、PLT降低, 差异均有统计学意义(P < 0.05)。WD脾亢病人脾切除术后14 d TBIL、DBIL、IBIL、TBA、ADA、PT、APTT和TT水平较术前下降, 总蛋白、白蛋白、FN、T-CHO、WBC、PLT、丙氨酸氨基转移酶、AST、m-AST、γ-谷氨酰基转移酶、LDH水平较术前增高, 差异均有统计学意义(P < 0.01)。结论WD病人脾切除术后肝脏合成功能与肝脏代谢功能均显著改善。排除手术创伤短期因素, 肝细胞损伤及膜通透性也有所好转, 脾脏切除术可以显著改善WD脾亢病人的肝功能。